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DNA亲子鉴定-从人体组织块中提取DNA

DNA亲子鉴定-从人体组织块中提取DNA

时间:2017-03-20来源:亲子鉴定中心点击:

DNA亲子鉴定即STR分型检测一般实验对样本的要求:细胞数量≥106个,DNA含量>20ng/µl,体积大于20µl。对于人体组织块样本是怎样提取DNA的呢?

a) 取适量组织块,用纯水冲洗;

b) 剪碎(或研磨成碎块),加入1 mL STE提取液(100 mmol/L NaCl,10 mmol/L Tris-HCI,1 mmol/LEDTA,pH8.0),混匀后加入20% SDS 75 µL,10 mg/mL 蛋白酶K 40 µL,于56℃酶解至清;

c) 于1.5 mL离心管中加入200 µL 10% Chelex 100(100-200目),加入上述酶解后溶液20 µL,混匀;

d) 56℃保温30 min;

e) 剧烈振荡5-10 s;

f) 沸水煮8 min;

g) 剧烈振荡5-10 s;10,000-15,000 r/min离心3 min;取上清液用于扩增反应;

h) 2-8℃保存或冻存剩余DNA,再次使用时重复步骤g)。